Экологический мониторинг и моделирование экосистем, т. XXXVI, № 1-2, 2025 Environmental Monitoring and Ecosystem Modelling, v. XXXVI, № 1-2, 2025
DOI: 10.24412/2782-3237-2025-1-2-79-88 УДК 57.044
Влияние стронция на половозрелую молодь Danio rerio
Э.В. Бабаева*, М.А. Федорова, С.В. Губайдулина, В.С. Фролова, А.Г. Тригуб, М.В. Медянкина
ФГБОУ ВО «Московский государственный Университет Технологий и Управления имени К.Г. Разумовского (ПКУ)»,
119049, г. Москва, ул. Шаболовская 14, ст.9, Российская Федерация
*Адрес для переписки: 79263841762@ya.ru
Аннотация. В настоящей статье приведены результаты эксперимен- тальных исследований оценки воздействия стронция на функционирование организма половозрелой молоди Danio rerio. Проведено определение недей- ствующей, пороговой и максимальной концентрации стронция, параметров токсичности и степени токсичности. Для половозрелой молоди D. rerio макси-
мально допустимая1) (недействующая) концентрация стронция по показателю
выживаемости составила 25.0 мг/л, пороговая2) (при которой было досто- верно отмечено воздействие) концентрация – 50.0 мг/л. По результатам гема- тологического анализа, можно заключить, что недействующая концентрация стронция для D. rerio составляет 10.0 мг/л.
Ключевые слова. Стронций, токсичность, гидробионты, выживае- мость, гематологический анализ, гистологический анализ.
The effect of strontium on mature juveniles Danio rerio
E.V. Babaeva*, M.A. Fedorova, S.V. Gubaidullina, V.S. Frolova,
A.G. Tregub, M.V. Medyankina
Razumovsky Moscow State University of Technology and Management (MCU), Moscow, 14, Shabolovskaya St., station 9, Russian Federation
*Correspondence address: 79263841762@ya.ru
Abstract. This article presents the results of experimental studiese valuating the effects of strontiumon the functioning of mature D. reriojuveniles. The inactive, the shold, and maximum strontium concentrations, to xicity parameters, and degree of acutetoxicity were determined. As aresult of the conductedre search, data on the effect of strontium on hydrobionts of various strophicunits were obtained. Formature D. rerio, the survival rate at the maximum allowable strontium
максимально допустимая концентрация вещества в воде – это концентрация, при которой в одном объекте не возникают последствия, снижающие его рыбохозяйственную ценность (в ближайшее время и в перспективе) или затрудняющие его рыбохозяйственное использование при постоянстве этой концентрации в воде водного объекта.
пороговая концентрация – минимальная концентрация вещества, вызывающая досто- верные изменения в организме.
Бабаева Э.В., Федорова М.А., Губайдулина С.В. и др. Babaeva E.V.,Fedorova M.A.,Gubaidullina S.V. et al.
concentration was 25.0 mg/l, at the threshold concentration – 50.0 mg/l. According to the results of hematology calanalysis, it can be concluded that the inactive strontium concentration for D. Reriois 10.0 mg/l.
Keywords. Strontium, toxicity, hydrobionts, survival, hematological analysis, histological analysis.
Стронций является постоянным компонентом гидросферы Земли. Пове- дение стронция в водной среде зависит от множества факторов. Первостепен- ное значение имеет его содержание в породах и почвах водосборного бассейна, либо водовмещающих породах (для подземных и грунтовых вод) (Мур, 1987). Изучение содержания стронция в почвенной и грунтовой воде показало, что содержание стронция в природной воде последовательно увели- чивается в ряду: атмосферные осадки («следовые» количества стронция), вода поверхностного стока (2.5 мг/дм3), почвенная вода (7 мг/дм3), озѐрная вода (23 мг/дм3) (Власов, 1973). В воде рек находится меньше 10-5% этого элемента (0.1 мг/дм3) (Виноградов, 1957).
Источниками стронция в природных водах являются горные породы, наибольшие количества его содержат гипсоносные отложения. Низкая кон- центрация стронция в природных водах объясняется слабой растворимостью их сернокислых соединений (растворимость SrSO4 при 18°С составляет 114 мг/дм3). В пресных водах концентрация стронция обычно намного ниже 1 мг/ дм3 и выражается в микрограммах на литр. Встречаются районы с повышен- ной концентрацией этого иона в водах. Подземные воды основное количество стронция получают из почвенных горизонтов в результате инфильтрации атмосферной влаги сквозь почвогрунты. В подземных водах биосферы содер- жание стронция в значительной мере контролируется их сульфатностью: в связи с низкой растворимостью целестина им бедны сульфатные воды. Нао- борот, в подземных хлоридных водах условия для миграции стронция благо- приятны в связи с отсутствием в них осадителя металла – сульфат-ионов
4
SO 2-. По этой причине глубинные хлоридные пластовые воды артезианских
бассейнов часто обогащены стронцием. При тектонических поднятиях подоб- ные воды по разломам местами поступают в верхние структурные этажи зем- ной коры и смешиваются с сульфатными водами, где формируется сульфатный барьер, на котором вместе с гипсом осаждается целестин (Перельман, 1982). Будучи близок к кальцию по химическим свойствам, стронций резко отличается от него по своему биологическому действию. Избыточное содержание этого элемента в природных водах вызывает "уров- скую болезнь" у человека и животных (по названию реки Уров в Восточном Забайкалье) – поражение и деформацию суставов, задержку роста и др. Хро- ническое поступление стронция в водную среду вызывает накопление метал- лов в живых организмах и представляет для них серьезную опасность из-за выраженной способности этого токсичного элемента к накоплению в тканях, особенно костной. Стронций (Sr) представляет серьезную опасность для рыб
Экологический мониторинг и моделирование экосистем, т. XXXVI, № 1-2, 2025 Environmental Monitoring and Ecosystem Modelling, v. XXXVI, № 1-2, 2025
из-за его структурного сходства с кальцием (Ca), которое обуславливает спо- собность Sr замещать Са в костной и других тканях. Следствием этого явля- ется нарушение обмена кальция в организме, а также его участия в кальций- зависимых метаболических процессах.
Иностранными учеными были проведены некоторые исследования
(Pasqualetti, Banfi, Mariotti, 2013) по влиянию стронция на костные ткани рыб
D. rerio с целью анализа возможности лечения болезней костей у человека препаратами, содержащими изотопы данного металла. Однако эффект, оказы- ваемый стронцием на особей D. rerio, изучен недостаточно глубоко.
Цель настоящей работы – необходимость изучения влияния стронция на половозрелую молодь D. rerio. Для достижения цели были поставлены задачи: исследовать влияние стронция на качество воды, изучить влияние на представителей водной экосистемы – на чувствительные тест-объекты, пре- жде всего – на половозрелую молодь D. rerio, выявить лимитирующие звенья.
Определение влияния вещества на взрослых рыб проводили на поло- возрелой молоди D. rerio. Хронические опыты продолжительностью 30 суток проводили в аквариумах объемом 5.0 л. Температура воды в течение всего
исследования составляла 24.0-24.5оС. Периодичность освещенности состав-
ляла 12 часов – свет, 12 часов – без света. Для определения плотности посадки, был измерен вес рыб. Средний вес особи размером 2.4-2.6 см перед посадкой в опыт в среднем составлял 0.23 г.
По окончании опытов рассчитывали параметры хронической токсично- сти: выживаемость, нарушения покровов тела, а также изменения морфофи- зиологических параметров. В хронических опытах изучали поведение и клиническую картину отравления рыб, гематологические, патологоанатоми- ческие и гистологические показатели.
Из гематологических показателей исследовали: количество эритроцитов и лейкоцитов, интенсивность кроветворения, морфологическую картину эри- троцитов, лейкоцитарную формулу.
Кровь у рыб отбирали из хвостовой артерии на 30-е сутки опытов. Под- счет эритроцитов и лейкоцитов проводили счетным методом под микроско- пом. Мазки фиксировались 96% этиловым спиртом. Окраску мазков проводили по Романовскому с добавлением фосфатного буфера, в соответ- ствии с протоколом производителя (11 мл красителя и 0.4 мл концентрата буфера на 70 мл воды) в течение 30 минут. Затем смывали водой и высуши- вали на воздухе. Клетки изучали под иммерсией при увеличении х 630 и х 900 (микроскоп «Микмед-1»). Для определения интенсивности кроветворения на мазках крови, окрашенных по Паппенгейму, вычисляли процент незрелых форм эритроцитов. Лейкоциты идентифицированы согласно работам Н.Т. Ива- новой (1983) и Т.П. Глаголевой (1985).
Отбор материала на гистологический анализ проводили в дни отбора проб на гематологические исследования от одних и тех же экземпляров рыб.
Бабаева Э.В., Федорова М.А., Губайдулина С.В. и др. Babaeva E.V.,Fedorova M.A.,Gubaidullina S.V. et al.
Патологоанатомические и гистологические исследования проводили по обще- принятой в ихтиопатологии схеме. Перед взятием образцов тканей для каждой исследованной особей был проведен внешний осмотр: изменение внешних покровов, их цвет и блеск, наличие повреждений чешуи, состояние глаза, цвет жабр, состояние плавников и хвоста.
Затем произведено патологоанатомическое исследование с оценкой состояния внутренних органов. В результате исследования проведена сравни- тельная визуальная оценка жабр и печени у экспериментальных особей D. rerio, как при содержании в чистой воде, так и при различных концентрациях токсического вещества.
Для гистологического анализа от каждой особи было вырезано 2 образца ткани (жабры и печень). Фиксацию образцов в 4%-ном растворе фор- мальдегида и гистологический анализ проводили согласно стандартным мето- дикам (Роскин, Левинсон, 1957), модифицированным во ВНИРО (Микодина и др., 2009). Гистологическую проводку зафиксированного материала прово- дили через автомат карусельного типа STP-120 для последовательной деги- дратации в спиртах восходящей концентрации (ксилоле и этаноле); заливку в парафин осуществляли на заливочной станции Thermo Fisher Scientific. Срезы толщиной 5 мкм получали на санном полуавтоматическом микротоме Microm и окрашивали готовой смесью гематоксилин-эозина по Эрлиху. Для фотогра- фирования микропрепаратов в лабораторных условиях использовали микро- скоп Olympus BX45 с цифровой видеокамерой Olympus DP25 и программу DC Viewer. Фотографии получали при увеличении окуляра 10× и объективов 20× и 40×. Все исследования проводили на фоне контроля в аналогичных условиях. На основании результатов исследований устанавливали пороговую и недействующую концентрации.
Исследование влияния стронция в концентрациях от 10.0 до 150.0 мгSr/л на выживаемость взрослых особей рыб проводили на половозрелых особях данио (D. rerio). Продолжительность опыта составила 30 суток. Динамика выживаемости представлена в табл. 1.
Концентрация, мгSr/л | Объем выборки (особи), шт. | Выживаемость рыб | р | Р* | ||
экз. | % | m | ||||
Контроль | 15 | 15 | 100 | 6.25 | - | - |
10 | 15 | 15 | 100 | 6.25 | - | - |
25 | 15 | 13 | 86.67 | 9.09 | 0.241 | 0.241 |
50 | 15 | 11 | 73.33 | 11.82 | 0.05 | 0.1 |
100 | 15 | 8 | 53.33 | 13.33 | 0.003 | 0.009 |
150 | 15 | 6 | 40 | 13.09 | 0 | 0.001 |
Экологический мониторинг и моделирование экосистем, т. XXXVI, № 1-2, 2025 Environmental Monitoring and Ecosystem Modelling, v. XXXVI, № 1-2, 2025
По результатам исследования хронического воздействия cтронция в диа- пазоне исследуемых концентраций достоверное влияние на выживаемость выявлено в концентрациях от 50.0-100.0 мг/л.
Оценка влияния соединения стронция на ткани и органы данио была проведена с использованием визуального и гистологического методов. Иссле- дования проводили на рыбах, выдержанных 30 суток в следующих концен- трациях стронция: 10; 25; 50; 100 и 150 мг/л. Окраска тела данио из контроля и всего исследованного диапазона концентраций на 30 сутки нормальная, кожные покровы без нарушений. Вскрытие D. rerio из контроля эксперимента и концентраций 10-25 мг/л не выявило каких-либо визуально определяемых изменений в органах и тканях. У особей из концентрации 50 мг/л отмечено изменение цвета селезенки.
В гистологической картине жабр из контроля и в концентрациях строн- ция от 25 до 150 мг/л отмечена гиперплазия респираторного эпителия и очаги фиброза (рис. 1).
В печени данио из контроля и концентраций 10 и 25 мг/л гистологиче- ское строение в целом соответствовало норме. В органах рыб, выдержанных в концентрациях препарата от 50 до 150 мг/л присутствовала жировая дистро- фия и очаги некроза (рис. 2).
Бабаева Э.В., Федорова М.А., Губайдулина С.В. и др. Babaeva E.V.,Fedorova M.A.,Gubaidullina S.V. et al.
Увеличение 10х×40х
Для гематологического анализа кровь у D. rerio брали из хвостовой артерии. Определяли количество эритроцитов, интенсивность кроветворе- ния, лейкоцитарную формулу, морфологическую картину эритроцитов. Под- счет эритроцитов осуществляли в камере Горяева. Клетки изучали под иммерсией при увеличении х630 и х900 (микроскоп «OLYMPUS»). Для определения интенсивности кроветворения на мазках крови, окрашенных по Романовскому-Гимза, вычисляли процент незрелых форм эритроцитов. Лейкоциты идентифицированы согласно работам Н.Т. Ивановой (1983) и Т.П. Глаголевой (1985). Исследования проводили на рыбах, выдержанных более 30 суток в следующих концентрациях стронция: 10; 25; 50; 100 и 150 мг/л. Проведенный гематологический анализ у D. rerio из контрольной группы показал обычное, нормальное состояние особей. Показатели пери- ферической крови следующие: количество эритроцитов у контрольной группы составило 3.10±0.06 млн/мм³ (табл. 2). При изучении мазков крови установлены: нормативная структура эритроцитов, интенсивность кровет- ворения и лейкоцитарная формула. Зрелые эритроциты эллипсоидной формы с округлым, слегка вытянутым ядром, повторяющим форму клетки. Окраска ядра фиолетовая, темная. Незрелые эритроциты (бластные формы) встречаются редко и составляют менее 1% от общего количества эритроци- тов. Лейкоцитарная формула, так же, как и у других видов рыб носит лим- фоидный характер – 91.17 ± 0.88%, моноциты и нейтрофилы составляют
4.00 ± 0.58 и 4.83 ± 0.33%, соответственно (контроль, табл. 3), однако доля лейкоцитов не так велика (<95%), что объясняется видовыми особенно- стями исследуемых особей.
Экологический мониторинг и моделирование экосистем, т. XXXVI, № 1-2, 2025 Environmental Monitoring and Ecosystem Modelling, v. XXXVI, № 1-2, 2025
Таблица 2. Эритрограмма D. rerio после воздействия соединения стронция (в млн/мкл)
Table 2. Erythrogram of D. rerio after exposure to strontium compound (in ppm)
Показатель | Концентрация (млн/мкл) | |||||
Контроль | 10 | 25 | 50 | 100 | 150 | |
М ± m | 3.10±0.06 | 3.09±0.04 | 2.89±0.09 | 2.87±0.08 | 2.83±0.05 | 2.71±0.20 |
% к контролю | - | 99.57 | 93.23 | 92.58 | 91.29 | 87.42 |
M – среднее значение показателя, m – ошибка среднего
Таблица 3. Лейкоцитарная формула крови D. rerio после хронического воздействия соединений стронция
Table 3. Blood leukocyte formula D. rerio after chronic exposure to strontium compounds
Лейкоциты, % | Среднее, ош. среднего | Доля, % | |||||
Контроль | 10 | 25 | 50 | 100 | 150 | ||
Лимфоциты | М | 91.17 | 90.50 | 87.33 | 84.67 | 78.16 | 72.48 |
±m | 0.88 | 1.15 | 0.33 | 0.88 | 6.36 | 2.36 | |
% к контролю | - | 99.27 | 95.79 | 92.87 | 85.74 | 79.50 | |
Моноциты | М | 4.00 | 4.00 | 5.00 | 5.33 | 6.99 | 8.67 |
±m | 0.58 | 0.58 | 0.00 | 0.88 | 1.07 | 1.86 | |
% к контролю | - | 100.00 | 125.00 | 133.33 | 174.75 | 216.67 | |
Нейтрофилы | М | 4.83 | 5.50 | 7.67 | 10.00 | 12.03 | 13.17 |
±m | 0.33 | 1.73 | 0.33 | 1.53 | 1.08 | 5.78 | |
% к контролю | - | 113.87 | 158.73 | 207.04 | 243.12 | 272.60 | |
M – среднее значение показателя, m – ошибка среднего
Изучение статистически значимого количества полей зрения на мазках крови рыб, выдержанных в разных концентрациях (10-150 мгSr/л) (табл. 3) показало наличие серьезных отклонений от рыб контрольной группы при кон- центрациях выше 50 мг/л, по отношению к крови контрольной группы (табл. 3; рис. 3А). При концентрации токсиканта 10 мг/л и контроле изученные пара- метры находятся в пределах нормы для данного вида (Murtha et al., 2003), однако при больших концентрациях наблюдается увеличение доли моноцитов и нейтрофилов (табл. 3), что свидетельствует о сильной реакции организма на воздействие токсиканта, выражающееся, по-видимому, в возникновении оча- гов воспаления и дегенерации тканей.
Форма клеток и ядер эритроцитов, состояние цитоплазмы и другие цел- люлярные характеристики, доступные для анализа при использовании свето- вой микроскопии, в большинстве концентраций не отличаются от контроля. При концентрации 150 мг/л у 5-7% эритроцитов наблюдаются искажения формы клеток и более блеклая окраска ядра.
Бабаева Э.В., Федорова М.А., Губайдулина С.В. и др. Babaeva E.V.,Fedorova M.A.,Gubaidullina S.V. et al.
А Б В
Рисунок 3. Мазки крови D. rerio (А – контроль; Б – исследуемая концентрация 25 мг/л; В – исследуемая концентрация 150 мг/л).
Figure 3. D. rerio blood smears (A, control; B – test concentration of 25 mg/l; B = test concentration of 150 mg/L).
По результатам исследования был выявлен показатель выживаемости при воздействии стронция на половозрелую молодь рыб в хроническом воздей- ствии: максимально допустимая концентрация (МДК) составила 25.0 мг/л, пороговая концентрация – 50 мг/л. По клиническим и патологоанатомическим показателям недействующая концентрация стронция для данио составила
25.0 мг/л. Гистологический анализ показал, что максимально возможная кон- центрация стронция для данио составляет 10 мг/л. При концентрации стронция
25.0 мг/л и более возникает гематологическая реакция на воздействие токси- канта. По результатам гематологического анализа, можно заключить, что недей- ствующая концентрация стронция для D. rerio составляет 10.0 мг/л.
Полученные результаты можно использовать в дальнейшем для обосно- вания регионального норматива ПДК для вод с природными особенностями и для совершенствования методологии разработки региональных нормативов.
Виноградов, А.П. (1957) Геохимия редких и рассеянных химических эле- ментов в почвах, М., Изд. АН СССР, 238 с.
Власов, М.А. и др. (1973) Бор и стронций в почвенных и грунтовых водах и минеральных озерах соленакопления Восточной Сибири. Микроэле- менты в биосфере и их применение в сельском хозяйстве и медицине Сибири и Дальнего Востока, Улан-Удэ, с. 113-117.
Глаголева, Т.П. (1985) Инструкция по клиническому анализу крови молоди лососевых рыб в условиях рыбоводных хозяйств с целью оценки их физиологического состояния и дифференциальной диагностики заболеваний, Рига, Изд-во БалтНИИРХ, 48 с.
Экологический мониторинг и моделирование экосистем, т. XXXVI, № 1-2, 2025 Environmental Monitoring and Ecosystem Modelling, v. XXXVI, № 1-2, 2025
Иванова, Н.Т. (1983) Атлас клеток крови рыб, М., Лег. и пищ. пром-сть, 184 с.
Микодина, Е.В., Седова, М.А., Чмилевский, Д.А., Микулин, А.Е., Пья- нова, С.В., Полуэктова, О.Г. (2009) Гистология для ихтиологов, опыт и советы, М., ВНИРО, 112 с.
Мур, Дж.В. (1987) Тяжелые металлы в природных водах, М., Мир, 488 с. Перельман, А.И. (1982) Геохимия природных вод, М., Наука, 154 p.
Роскин, Г.И., Левинсон, Л.Б. (1957) Микроскопическая техника, М., Советская наука, 467 с.
Murtha, Jill, M., Evan, T. Keller. Characterization of the heat shock response in mature zebrafish (Danio rerio), электронный ресурс, URL: https:// pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12814804/ (Дата обращения: 07.10.2024)
Sara Pasqualetti, Giuseppe Banfi, Massimo Mariotti, University of Milan, Italy. The effects of strontium on skeletal development in zebrafish embryo, элек- тронный ресурс, URL: https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/ S0946672X13000928?via%3Dihu (Дата обращения: 07.10.2024).
Vinogradov, A.P. (1957) Geohimiya redkih I rasseyannyh himicheskih elementov v pochvah [Geochemistry of rare and dispersed chemical elements in soils], M., Izd. AN SSSR, Moscow, Russia, 238 p.
Vlasov, M.A. i dr. (1973) Bor i stroncij v pochvennyh I gruntovyh vodah I mineral'nyh ozerah solenakopleniya Vostochnoj Sibiri, Mikroelementy v biosfere I ih primenenie v sel'skom hozyajstve i medicine SibirI I Dal'nego Vostoka [Boron and strontium in soil and groundwater and mineral lakes of the salt accumulation of Eastern Siberia. Microelements in the biosphere and their application in agriculture and medicine in Siberia and the Far East], Ulan-Ude, Russia, pp. 113-117.
Glagoleva, T.P. (1985) Instrukciya po klinicheskomu analizu krovimolodilososevyhryb v usloviyah rybovodnyh hozyajstv s cel'yu ocenki ih fiziologicheskogo sostoyaniyai differencial'noj diagnostic izabolevanij [Instructions for clinical blood analysis of juvenile salmon fish in the conditions of fish farms in order to assess their physiological state and differential diagnosis of diseases], Riga, Izd-vo Balt NIIRH, Russia, 48 p.
Ivanova, N.T. (1983) Atlas kletok krovi ryb [Atlas of fish blood cells], Leg. I pishch. prom-st', Moscow, Russia,184 p.
Mikodina, E.V., Sedova, M.A., Chmilevskij, D.A., Mikulin, A.E., P'yanova, S.V., Poluektova, O.G. (2009) Gistologiya dlya ihtiologov, opytisovety [Histology for ichthyologists, experience and advice], VNIRO, Moscow, Russia, 112 p.
Mur Dzh. V. (1987) Tyazhelyemetally v prirodnyhvodah [Heavy metals in natural waters], Mir, Moscow, Russia, 488 p.
Бабаева Э.В., Федорова М.А., Губайдулина С.В. и др. Babaeva E.V.,Fedorova M.A.,Gubaidullina S.V. et al.
Perel'man, A.I. (1982) Geohimiya prirodnyh vod [Natural water geochemistry], Nauka, Moscow, Russia, 154 p.
Roskin, G.I., Levinson, L.B. (1957) Mikroskopicheskaya tekhnika
[Microscopic technique], Sovetskaya nauka, Moscow, Russia, 467 p.
Murtha, Jill, M, Evan, T. Keller. Characterization of the heat shock response in mature zebrafish (Danio rerio, еlektronnyj resurs, URL: https:// pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12814804/ (Data obrashcheniya: 07.10.2024).
Sara Pasqualetti, Giuseppe Banfi, Massimo Mariotti. University of Milan, Italy. The effects of strontium on skeletal development in zebrafish embryo, еlektronnyj resurs, URL: https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/ S0946672X13000928?via%3Dihu (Data obrashcheniya: 07.10.2024).
Статья поступила в редакцию (Received): 05.03.2025
Статья доработана после рецензирования (Revised): 21.04.2025.
Бабаева, Э.В., Федорова, М.А., Губайдуллина, С.В., Фролова В.С, Три- губ, А.Г., Медянкина, М.В. (2025) Влияние стронция на половозрелую молодь Danio rerio, Экологический мониторинг и моделирование экосистем, т. ХXXVI, № 1-2, с. 79-88, doi:10.24412/2782-3237-2025-1-2-79-88.
Babaeva, E.V.,Fedorova, M.A., Gubaidullina, S.V., Frolova,V.S., Tregub, A.G., Medyankina, M.V. (2025) The effect of strontium on mature juveniles Danio rerio, Ecological monitoring and modeling of ecosystems, vol. XXXVI, № 1-2. pp. 79-88, doi:10.24412/2782-3237-2025-1-2-79-88.